良好的开端是成功的一半,作为实验开始前的准备工作,如何进行样品的接受与运输对您和我们都非常重要,本文介绍了佰昊生物的送样要求,且内容持续更新,供您随时掌握佰昊生物的最新版送样要求。
病理样本接收与运输标准
V2.0-20230224
一、组织样本
(一)制备
石蜡切片样本组织
1.取材:
A.使用锋利的刀片进行取材,避免在组织上反复接触造成的机械损伤,尽量保存组织原始结构和状态;
B.取材后,使用等渗生理盐水或 PBS 缓冲液(7.2-7.4)(使用前需在 4℃冰箱中预冷)漂洗,减少组织血液残留(观察血液情况样本除外);
C.取材后,需立即置于固定液中固定,减少样本在空气中的暴露时间;
2.固定:
A.根据样本特性和实验目的选择适合的固定液进行固定;(常用固定液:10%中性甲醛溶液/福尔马林、4%多聚甲醛溶液)。
B.固定液体积建议是样本体积的 10 倍以上,且组织不受固定容器挤压;
C.固定组织不宜过大过厚,组织长宽建议在 2cm 内,厚度不超过 5mm;大块组织可修剪成小块组织固定;
D.不同类型组织分管存放,置于阴凉避光处保存,有条件可以放置在 4℃冰箱中保存;
E.固定时间不宜过长,常规样本固定 24h 可进行后续包埋,如需长时间保存,建议固定时间不超过半年;时间长会影响后续病理实验效果。
3.运输:
A.样本邮寄注意固定管密封完好,避免漏液现象发生;同时做好减震处理,防止因运输过程造成固定管损坏。
B.固定样本可常温运输,如需长时间运输或温度影响可以采用冰袋冷藏运输,切记不要使组织冷冻;
C.样本运输需提供样本信息表(电子版/纸质版)。
(二)制备冰冻切片样本组织
1.取材
使用锋利的刀片进行取材,避免在组织上反复接触造成的机械损伤,尽量保存组织原始结构和状态;
2.保存方法:
A.方法一:
取材后样本,擦干组织表面水分,立即置于液氮/液氮预冷的异戊烷中迅速冷冻处理;并置于-80℃超低温冰箱中保存;
B.方法二:
取材后样本,置于固定液中固定(同石蜡样本固定方法),4℃冰箱中保存。
3.运输要求:
冻存样本使用干冰运输,固定样本同制备石蜡切片样本的运输要求。
(三)制备电镜样本组织
1.取材
A.使用锋利的刀片进行取材,避免在组织上反复摩擦造成的机械损伤,尽量保存组织原始结构和状态;
B.取材在冰台上操作,在组织表面滴撒 4℃预冷的戊二醛固定液,快速取材,且样本取材厚度保持在 1mm 厚,时间控制在 1min 以内。
C.取材后,立即置于 4℃预冷的戊二醛溶液中固定;
2.固定:
A.固定时间 2h 以上即可进行后续实验,固定时间不建议超过 1 个月,固定置于 4℃冰箱中保存。
B.固定液体积是样本体积的 10 倍以上,确保固定充分
C.固定液由我方提供,取样前请做好联系。
3.运输要求:
固定样本使用冰袋冷藏运输,注意做好防冻。
二、蜡块样本
1.客户提供蜡块样本需提供标准框包埋蜡块,非标准框包埋样本,实验室将会重溶组织进行包埋,另行收取包埋费用;
2.已使用过的蜡块组织需进行封蜡,避免与空气接触,导致组织碎裂;
3.蜡块样本可常温条件下保存和邮寄;
4.邮寄过程中注意包裹减震,防止运输过程造成蜡块损坏。
5.邮寄样本需提供样本信息表(电子版/纸质版均可)。
三、切片样本
1.提供切片样本确保玻片上信息清晰,避免使用记号笔在玻片上进行标记;
2.切片需放置在切片盒中,必要时可在切片盒内放置气泡膜等,切片盒开口处使用胶带密封,防止运输过程中开启;
3.切片盒需使用防震泡沫或气泡膜等进行包裹,以防运输过程中对玻片造成损坏;
4.邮寄样本需提供样本信息表(电子版/纸质版均可)。
四、细胞样本
1.进行病理染色/免疫细胞化学/免疫荧光(ICC/IF)等检测的细胞样本,可提供培养好的细胞,使用细胞培养瓶邮寄。
2.细胞培养瓶需装满培养基,且细胞状态良好;
3.实验室负责进行细胞爬片样本制备;会另行收取费用;
4.不建议邮寄细胞爬片样本;
五、病理试剂及抗体
请结合试剂盒说明书或抗体保存条件等要求进行邮寄。
六、病理样本邮寄地址
邮寄地址:辽宁省沈阳市苏家屯区乔松路 2 号沈阳医药职业学院
收件人:企业老师 高老师
电话:15134173663
收样时间:周一到周五(周末及法定节假日不收样)
细胞株接收与运输标准
一、细胞株
1.对于冻存细胞,细胞数要求 105 个以上;对于复苏细胞,悬浮细胞细胞数要求 105 个,贴壁细胞贴壁率 60%以上,要求灌满培养基常温运输;
2.细胞要求无真菌、细菌、支原体、黑胶虫等污染,细胞状态良好。
二、细胞转染用质粒样品
质粒要求浓度在 500 ug/mL 以上,去内毒素。
三、注意事项
1.打包样本时请使用封口膜封好管口、瓶口或培养皿,避免运输途中因管盖、皿盖松动造成污染;
2.每个样本请对应样品信息单做好标记,避免样本混淆,进而影响下一步实验的进行;
3.做好标记、用封口膜封好的样本放在泡沫或棉花中固定,并彼此隔开包装在自封袋中,尤其是干冰运输邮寄的样本,需包装仔细,避免运输途中干冰挥发后运输中磕碰导致样本损坏;
4.干冰运输的样本尽量选择厚实结实的泡沫保温盒,建议在泡沫保温盒外加包纸箱,避免遭遇暴力运输时泡沫保温箱破损导致干冰泄露、样本损坏或丢失。
5.请务必标记清楚并随样品附上样品信息单;
6.冬季气温过低不接收复苏细胞;
7.样品请自行保留备份,以便在出现外源污染的情况时能迅速查清原因;
8.实验用细胞我方不提供免费保存,实验结束后将予以清理,请自行备份;
9.所送细胞样品不提供转寄等服务,仅用于该实验服务。
四、细胞株样本邮寄地址
邮寄地址:辽宁省本溪市溪湖区石桥子创新园北区 B1 区 3 层 佰昊生物
收件人:王老师
电话:13194143500
收样时间:周一到周五(周末及法定节假日不收样)
其他样本接收与运输标准
一、核酸类样本
1. PCR 产物:
浓度≥50ng/uL,总体积≥30μL,OD260/280=1.8-2.0,一般总量 2-10ug。乙醇沉淀 DNA 或冻干 DNA,可冰袋运输,不超过 3 天。
2.基因组 DNA:
浓度≥50ng/uL,总体积≥30uL,OD260/280=1.8-2.0,一般总量 2-5ug。乙醇沉淀 DNA 或冻干 DNA,可冰袋运输,不超过 3 天。
3.质粒:
浓度≥200ng/uL ,总体积≥15uL (建议最后溶解时使用无核酸酶水) , OD260/280=1.8-2.0,一般总量 3-5ug。可以是 30%甘油菌,总体积≥200uL,可冰袋运输,不超过 3 天。
4.Total RNA 样品:
浓度≥100ng/µl,总体积≥30µl,OD260/280=1.9-2.1,一般总量 2- 10µg,电泳有两条清晰无离散的条带,且 28S(原核生物为 23S)亮度为 18S(原核生物为 16S)的一倍。运输时使用足量的干冰。如果进行 PCR Array 等对 RNA 完整性要求较高的实验,还需 RIS≥8.0(RIN≥7.0)。
二、DNA抽提样本
1.对于需要 DNA 抽提的细胞样品需 PBS 清洗 2 次后,离心,尽量吸除上清,留细胞沉淀,液氮速冻,并保存于-80℃冰箱,运输时使用足量的干冰。
2.对于需要 DNA 抽提的组织样品,请使用新鲜取样的实验材料,分成小块,用生理盐水或 PBS 冲去血液、粪便等杂质,滤纸吸干水分,液氮速冻,并保存于-80℃冰箱,运输时使用足量的干冰。
三、RNA抽提样本
1.需要 RNA 抽提的细胞样品:
PBS 清洗 2 次后,离心,尽量吸除上清,留细胞沉淀,液氮速冻,并保存于-80℃冰箱,运输时使用足量的干冰。
2.对于需要 RNA 抽提的组织样品:
请使用新鲜取样的实验材料,分成小块,用生理盐水或 PBS 冲去血液、粪便等杂质,滤纸吸干水分,液氮速冻,并保存于-80℃冰箱,运输时使用足量的干冰。
四、全蛋白提取样本
1.对于需要全蛋白提取的细胞样品:
PBS 清洗 2 次后,离心,尽量吸除上清,留细胞沉淀,液氮速冻,并保存于-80℃冰箱,运输时使用足量的干冰。
2.需要全蛋白提取的组织样品:
请使用新鲜取样的实验材料,分成小块,用生理盐水或 PBS 冲去血液、粪便等杂质,滤纸吸干水分,液氮速冻,并保存于-80℃冰箱,运输时使用足量的干冰。
五、样本邮寄地址
邮寄地址:辽宁省本溪市溪湖区石桥子创新园北区 B1 区 3 层 佰昊生物
收件人:王老师
电话:13194143500
收样时间:周一到周五(周末及法定节假日不收样)